Bosphore Thrombophilia Panel Kiti v2 (Fast Extraction)

Bosphore® Thrombophilia Panel Kiti v1, 98/79/EC Talimatı uyarınca IVD-CE onaylı Real-Time PCR temeline dayanan tıbbi bir vücut-dışı tanı kitidir. Bosphore® FII-FVL Saptama Kiti v1, insan biyolojik örneklerindeki FII geninin 3’ UTR bölgesinde meydana gelen Faktör II mutasyonu (Prothrombin  20210 Mutasyonu/ guanin 20210 adenin mutasyonu), Faktör V geninde meydana gelen ve seçilen başlangıç kısmına göre aminoasit 1691’de Glutamik asidin Arjinine dönüşümü ile sonuçlanan Faktör V Leiden mutasyonu, MTHFR geninde meydana gelen C677T (sitozin 677 timin mutasyonu) mutasyonu, ve MTHFR geninde meydana gelen A1298C (adenin 1298 sitozin mutasyonu) mutasyonunu multipleks PCR yöntemiyle aynı anda saptar.

 

1.Tüpte  gerçekleşen reaksiyonda wild type FII aleli çoğaltılır ve Cy5 filtresi kullanılarak floresans sinyal tespiti yapılır. Mutant FII aleli çoğaltılır ve Texas RED filtresi üzerinden floresans sinyal tespiti yapılır. Wild type F5 aleli çoğaltılır ve HEX filtresi kullanılarak floresans sinyal tespiti yapılır. Mutant F5 aleli çoğaltılır ve FAM filtresi üzerinden floresans sinyal tespiti yapılır.

 

2. Tüpte gerçekleşen reaksiyonda wild type MTHFR A1298C aleli çoğaltılır ve Cy5 filtresi kullanılarak floresans sinyal tespiti yapılır. Mutant MTHFR A1298C aleli çoğaltılır ve Texas RED filtresi üzerinden floresans sinyal tespiti. Wild type MTHFR C677T geni çoğaltılır ve HEX filtresi üzerinden sinyal tespiti yapılır. Mutant MTHFR C677T aleli çoğaltılır ve FAM filtresi üzerinden floresans sinyal tesğiti yapılır.

Tam kan örnekleri, kitin içeriğinde bulunan EX-Tract DNA solüsyonu ile inkübe edilerek PCR’a hazır hale getirilir. Biyolojik örneklerin parçalanmasını ve DNA’nın ortama salınmasını sağlar. PCR inhibitörleri inkübasyon esnasında efektif bir şekilde inaktive edilir ve elde edilen lizat doğrudan PCR’da kullanılır.  Bu sayede harici bir DNA izolasyonu uygulamasına gerek kalmamaktadır.